為細(xì)胞換液時(shí),要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細(xì)胞中,以免損傷細(xì)胞,當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。
使用無(wú)菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí),每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,換液是一項(xiàng)非常常規(guī)操作,它主要是為了清除細(xì)胞在生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的各種代謝廢物,補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。那么,如何更換細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的溶液呢?
1、將器材放入超凈臺(tái),打開(kāi)紫外照射滅菌,若是培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感,可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃,再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌。另外,細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。
2、從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒,轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái),打開(kāi)蓋子,輕輕吸出舊的培養(yǎng)液,可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基,注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入培養(yǎng)基,應(yīng)從側(cè)壁加,動(dòng)作輕柔,以免沖落細(xì)胞。
3、加好培養(yǎng)基后,蓋上蓋子,在瓶子上做標(biāo)記,注明換液時(shí)間,細(xì)胞種類,操作人員等信息。
4、放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面,然后應(yīng)記得整理操作臺(tái),用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面,清理廢液和垃圾。
在進(jìn)行換液操作時(shí),全程注意無(wú)菌,操作人員要穿好滅菌服,戴好滅菌手套和口罩,手接觸到細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口時(shí)一定要小心,避免造成污染。